羊了会引起视网膜炎症?!

时间:2023-01-12  来源:  作者: 我要纠错


据了解,全国多地小羊人出现眼部不适的症状。据Nature子刊《Nature Communications》发表论文称,新冠病毒可以通过三叉神经和视神经的神经元,从肺部传播至大脑和眼睛,导致眼部不适和视网膜炎症,严重的情况下还会诱发深度感知下降或视力丧失。

近日,某医院接诊的一名20岁患者(女),该患者感染新冠发烧3天后,突然视力下降到0.02,连视力表上最大的视标都看不清,几近失明,被诊断为急性黄斑区神经视网膜病变(新冠引起的眼部并发症)。

经眼部专科检查,她的双眼黄斑区可见暗红褐色病灶,色素紊乱,外层视网膜高反射病灶,集中在黄斑区视网膜外核层,椭圆体带和嵌合体带断裂。结合病史及专科检查,医生确诊其为急性黄斑区神经视网膜病变。

  

该院眼科副主任医生认为,该患者病症为新冠感染并发症,“新冠病毒可能存在眼部趋向性,能通过不同神经组成的精密网络,从上呼吸道传播至眼睛,侵占眼部后,会诱发促炎症细胞因子以及趋化因子水平的升高,从而造成眼部不适以及视网膜或视神经炎症”。

这个横扫全世界的病毒易引起视网膜神经炎症,而早在2011年就有日本学者研究了越桔花青素干预治疗视网膜炎症引起的视功能下降。

递法明片越桔果花青素提取物,作为全球唯一批准的花青素高纯度药物制剂。在治疗视网膜病变领域中是众多专家公认的经典药物。欧洲越桔果提取物(递法明片)对视网膜炎症期间视功能有保护作用。

图片3.png 

在日本东京庆应义塾大学视网膜细胞生物学实验室和日本东京庆应义塾大学眼科联合日本东京Wakasa Seikatsu公司《欧洲越桔果提取物保护视网膜炎和葡萄膜炎期间的视功能的细胞及分子机制》研究中

建立了内毒素诱导性葡萄膜炎(EIU)的小鼠模型,使用富含花色素苷的欧洲越桔果提取物对小鼠进行了预处理,分析了其对视网膜的作用。

在细胞水平,经过欧洲越桔果提取物处理的动物中,其EIU相关视紫红质的下降以及光感受器细胞外节段的缩短均受到了抑制。此外,该提取物还阻止了STAT3的激活,STAT3可诱导炎症引起的视紫红质下降,还可抑制促进STAT3激活的白介素6表达增加。

除了这些抗炎症效应,富含欧洲越桔果提取物还可减轻炎症视网膜细胞内活性氧的增高及对氧化还原敏感的转录因子NF-κB的激活。

我们的研究结果表明,富含花青素的欧洲越桔提取物对视网膜炎症期间的视功能有保护作用。

欧洲越桔果提取物对视网膜中视觉功能的保护作用

为了检测EIU过程中欧洲越桔果提取物的作用,我们检测了视网膜电图(ERG)的反应。a波和b波的波幅反映了光感受器细胞的以及下级和后期神经元的功能,和对照组相比,这两波的波幅均下降,而EIU小鼠模型的b波持续时间延长(图1a-c和e)。然而,使用欧洲越桔果提取物处理均可预防这些改变。三组中均未发现a波的持续时间有改变。
图片4.png图1:欧洲越桔果提取物对EIU时视觉功能的保护作用。

(a)采用每组一只小鼠的典型反应做代表;(b)a波波幅的下降;(c):EIU期间b波波幅的下降被欧洲越桔果提取物治疗明显抑制。(d):a波的持续时间未发生变化。(e):EIU期间b波持续时间的显著延长被欧洲越桔果提取物的治疗所抑制。*P<0.05;**P<0.01;n=5或6。

(Bilberry:欧洲越桔果组;Vehicle:溶剂组;control:对照组;a-wave:a波;b-wave:b波;Amplitude:波幅;implicit time:持续时间。)

 

EIU期间欧洲越桔果提取物对视紫红质水平的保持作用

因为视网膜电图(ERG)上a波的变化反映了光感受器细胞的异常,因此我们采用免疫印迹法检测了视紫红质蛋白的水平(图2a和b)。EIU模型中视网膜的视紫红质蛋白显著降低,而采用欧洲越桔果提取物治疗可阻止这种下降。

视紫红质主要集中于视杆细胞的外节段,我们通过HE染色对其进行了检测。EIU时,外节段的长度显著缩短,但是使用富含花色素苷欧洲越桔果提取物治疗可阻止这种缩短(图2c和d)。视网膜切片中其它视网膜层未发现明显改变,这和以前的报告一致【14】

图片5.png 

图2:EIU期间欧洲越桔果提取物对视紫红质水平的保持作用。(a, b):免疫印迹分析。欧洲越桔果提取物的治疗阻止了EIU期间视紫红质蛋白的下降。*P<0.05;n=5。(c, d):视网膜切片的HE染色。欧洲越桔果提取物的治疗阻止了EIU期间光感受器外节段长度的缩短。**P<0.01;n=4。比例尺:50微米;IS:内节段;ONL:外核层;OS:外节段。
(Bilberrry:欧洲越桔果组;Vehicle:溶剂组;control:对照组;Rhodopsin:视紫红质;α-Tubulin:α-微管蛋白;relative OS length:相对外节段长度)

欧洲越桔果提取物对EIU诱导的视网膜STAT3激活的抑制作用

在出现炎症的视网膜中,视紫红质的下降和STAT3的激活具有相关性16,17】。免疫印迹分析显示,在EIU期间STAT3的激活增加,而这种增加可以被欧洲越桔果提取物的治疗所抑制(图3)。因此,STAT3的激活和视紫红质的水平呈负相关。

图片6.png 

图3:欧洲越桔果提取物对EIU诱导的视网膜STAT3激活的抑制作用。

(a, b):免疫印迹分析。通过检测pSTAT3对激活的STAT3进行评估。使用富含花色素苷欧洲越桔果提取物治疗明显防止了EIU过程中pSTAT3的增加。*P<0.05,**P<0.01;n=5。pSTAT3:磷酸化STAT3。

(Bilberrry:欧洲越桔果组;Vehicle:溶剂组;control:对照组;α-Tubulin:α-微管蛋白)

 

欧洲越桔果提取物对EIU视网膜中促炎症性细胞因子的抑制

有一种可激活STAT3的促炎症性细胞因子为IL-6。本研究采用实时PCR技术对IL-6 mRNA的表达水平进行了检测(图4),在EIU期间该表达显著上调,而欧洲越桔果提取物的治疗可抑制这种上调。

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图4:欧洲越桔果提取物对EIU视网膜中促炎症性细胞因子的抑制。

实时PCR。EIU模型中视网膜内的IL-6mRNA的水平增高,但是被欧洲越桔果提取物所抑制。*P<0.05;n=5、6和6。IL-6:白介素6。

(Bilberrry:欧洲越桔果组;Vehicle:溶剂组;control:对照组)

 

欧洲越桔果提取物对EIU视网膜中氧化性应激的抑制

为了评估氧化性应激的程度,我们使用了DHE,这种物质和活性氧(ROS)反应后可在细胞核内转化为发红光的物质【23】。在EIU模型视网膜的GCL、INL和ONL中,代表活性氧(ROS)的红光均上调;然而,欧洲越桔果提取物治疗可阻止这种改变(图5)。

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图5:欧洲越桔果提取物对EIU视网膜中氧化性应激的抑制。

(a)各组和DHE反应的视网膜切片的代表性数字图像。(b)使用ImageJ检测荧光强度并进行平均。使用欧洲越桔果提取物治疗抑制了EIU期间DHE荧光的增高。**P<0.001;n=4。比例尺:50微米。DHE:超氧化物阴离子荧光探针

(Bilberrry:欧洲越桔果组;Vehicle:溶剂组;control:对照组;Relative fluorescence intensity:相对免疫荧光强度)

 

富含花色素苷欧洲越桔果提取物对EIU视网膜中NF-κB的抑制

为了进一步探索活性氧(ROS)和IL-6诱导之间的关系,我们检测了对氧化还原敏感的转录因子NF-κB【24】,该因为位于IL-6的上游。我们采用免疫印迹分析检测了EIU诱导后视网膜内磷酸化p65,这是激活后NF-κB的一种成分。在EIU期间,视网膜内激活后NF-κB的水平增高;然而这种增高可被富含花色素苷欧洲越桔果提取物的治疗所抑制(图6)。

图片9.png 

图6:富含花色素苷欧洲越桔果提取物对EIU视网膜中NF-κB的抑制。

(a, b):免疫印迹分析。根据对磷酸化p65进行检测评估了NF-κB的激活。富含花色素苷欧洲越桔果提取物的治疗显著抑制了EIU诱导后的NF-κB的激活。*P<0.05;**P<0.01;n=5、6和7。

(Bilberrry:欧洲越桔果组;Vehicle:溶剂组;control:对照组;α-Tubulin:α-微管蛋白)

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